山西甲烷转染试剂—常用的甲基化试剂有哪些
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常用的甲基化试剂有哪些
最佳答案1）硫酸二甲酯，(CH3)2SO4
硫酸二甲酯很便宜，因此是工业上用的最多的甲基化试剂。缺点是毒性比较强。
（2）碘甲烷，CH3I
碘甲烷在实验室中比较常用，由于其沸点很低，所以反应后过量的碘甲烷很容易通过旋蒸除去。碘甲烷比较昂贵，而且毒性也较强。
（3）硫酸衍生物酯类，比如对甲苯磺酸甲酯CH3OTs，三氟甲磺酸甲酯CH3OTf。
这类物质也是实验室常用的甲基化试剂，由于其常温下的蒸汽压很小，所以不易挥发，对人体毒害小一些。缺点还是成本比较高。
衍生化方法的生化试剂
最佳答案衍生化试剂很多，简单的说：它能帮你将不能分析的样品通过衍生化试剂反应转化为可分析的化合物.衍生化试剂比如有：烷基化试剂、硅烷化试剂、酰化试剂类、荧光衍生化试剂、 紫外衍生化试剂、苯甲酰氯衍生化试剂、羟基衍生化试剂 、 手性衍生化试剂、氨基衍生化试剂、气相色谱和液相色谱中常用的柱前衍生化方法、固相化学衍生化法。高效液相色谱法有甲醛与2，4－二硝基苯肼（DNPH）反应生成腙，衍生化产物醛腙用有机溶剂萃取富集后，在一定温度下蒸发、浓缩，再以甲醇或乙腈溶解或稀释，最后进行色谱测定。
虽然已有许多的衍生化试剂被使用，但是目前开发新的衍生化试剂仍然是一个活跃的研究领域，其主要目的是不断提高灵敏度和选择性以及扩大应用范围。
衍生化试剂要求：①衍生剂必须过量且稳定；不过量反应不完全，检测不充分。不稳定，重现性差；②衍生物、衍生产物和衍生副产物至少是好分离的。当然如果只能检测到衍生产物最好；③衍生反快速完全。反应慢，柱前衍生还可以，但柱后不行。因为流速固定，衍生池管路长度一定，留给衍生化的时间是一定的。柱前衍生可以在系统外等衍生完毕后进样，但也是影响效率的。 硅烷基指三甲基硅烷Si(CH3)3或称TMS。硅烷化作用是指将硅烷基引入到分了中，一般是取代活性氢。活性氢被硅烷基取代后降低了化合物的极性，减少了氢键束缚。因此所形成的硅烷化衍生物更容易挥发。同时，由于含活性氢的反应位点数目减少，化合物的稳定性也得以加强。硅烷化化合物极性减弱，被测能力增强，热稳定性提高。
硅烷化在GC分析中用途最大。许多被认为是不挥发性的或是在200～300℃热不稳定的羟基化合物经过硅烷化后成功的进行色谱分析。
硅烷化试剂作用同时受到溶剂系统和添加的催化剂的影响。催化剂的使用(如三甲基氯硅烷，吡啶)可加快硅烷化试剂的反应。确定好硅烷化反应的时间和温度至关重要。必须知道衍生化的转化速率，以实现对未知样品的定最分析。硅烷化试剂一般都对潮气敏感，应密封保存以防止其吸潮失效。这些硅烷化试剂适用于范围较广，但如果使用过最，则可能给火焰离子化检测器造成些麻烦。
三甲基硅烷是GC分析最常用的通用硅烷化基团。引入此基团可改善色谱分离，并使得特殊检测技术的应用成为可能。
硅烷化试剂还可以用于对玻璃器具（如GC的内衬管）和色谱的担体进行去活化。
硅烷化试剂主要是（氯）甲基硅烷系列。见下：
双（三甲基硅烷基）乙酰胺——（BSA）
N,O-二（三甲基硅烷）乙酰胺——（BSA）
双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺——（BSTFA）
二甲基二氧硅烷——（DMDCS）
六甲基二硅胺——（HMDS）
1,1,1,3,3,3六甲基硅氮烷——（HMDS）
N-(叔丁基二甲基硅烷基)-N-甲基三氟乙酰胺——(MTBSTFA)
N-甲基三氟乙酰胺——(MTBSTFA)
三氟乙酸——（TFA）
三甲基氯硅烷——（TMCS）
三甲基硅烷咪唑——（TMSI）
二甲基二氯硅烷——（DMDCS）
N-甲基-n-(三甲基硅烷)三氟乙酰胺（MSTFA） 酰化作用作为硅烷化的代替方法，可通过羧酸或共衍生物的作用将含有活泼氢合物（如-OH、-SH、-NH）转化为酯、硫酯或酰胺。含有卤离了的羰基基团可增强电了捕获检测器酞化作用具有很多优点：
保护不稳定基团，从而增加了化合物的稳定性；
可提高如糖类，氨基酸等物质的挥发性。这些物质常带有大量的极性官能团，加热时易分解；
有助于混合物的分离；
使用ECD检测，分析物检测下限可降低很多。
常用的酰基化试剂有：乙酸酐（AA）、三氟乙酸酐（TFAA）、五氟丙酸酐（PFPA）、七氟丁酸酐（HFBA）、N-甲基双（三氟乙酸酐）咪唑（MBTFA）、1-(三氟乙酰)咪唑（TFAI）等。 烷基化作用是将烷基官能团(脂肪族或脂肪，芳香族)添加到活性官能团(H)上。以烷基基团代替氢的重要性在于生成的衍生物与原来化合物相比极性大为下降。该试剂常用于修饰改良含有酸性氢的化合物如羧酸和苯酚。
生成的产物有醚，酯，硫醚，硫酯，正烷基胺和正烷基酰胺。弱酸性官能团(如醇)的烷基化要求有强碱催化剂（氢氧化钠，氢氧化钾）。酸性稍强的OH基团如苯酚和羧酸，弱碱催化剂(氯化氢，三氟化硼)即可。
常用的烷基化试剂有重氮甲烷、2,2二甲基丙烷（DMP）、18-冠醚-6、硼酸正丁酯（NBB）、O-盐酸甲氧基胺、五氟苄基溴（PFBBr）、N-甲基-N-亚硝基对甲苯磺酰胺（Diazald）、N,N-二甲基甲酰胺二缩叔乙醛（DMF-DBA）、N,N-二甲基甲酰胺二缩乙醛（DMF-DEA）、N,N-二甲基甲酰胺二缩甲醛（DMF-DMA）、N,N-二甲基甲酰胺二缩丙醛（DMF-DPA）、1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍（MNNG,97%） 、三甲基苯胺——（TMAH）等。 常用紫外衍生化试剂
⑴2,4-二硝基氟苯（最大吸收波长350nm，摩尔吸收系数>104）
⑵对硝基苯甲酰氯（最大吸收波长254nm，摩尔吸收系数>104）
⑶ 对甲基苯磺酰氯（最大吸收波长224nm，摩尔吸收系数=104）
⑷异硫氰酸苯酯（最大吸收波长244nm，摩尔吸收系数=104）
⑸ 对硝基苯基溴（最大吸收波长265nm，摩尔吸收系数6200 ）
⑹ 对溴代苯甲酰甲基溴（最大吸收波长260nm，摩尔吸收系数=1.8×104）
⑺ 萘酰甲基溴（最大吸收波长248nm，摩尔吸收系数=1.8×104）
⑻N,N对硝基苄基异丙基异脲(最大吸收波长265nm，摩尔吸收系数6200）
⑼3,5二硝基苯甲酰氯（最大吸收波长248nm，摩尔吸收系数=104）
⑽对甲氧基苯甲酰氯（最大吸收波长262nm，摩尔吸收系数=1.6×104）
⑾2,4二硝基苯肼（最大吸收波长254nm，摩尔吸收系数=1.8×104）
⑿ 对硝基苯甲氧胺盐酸盐（最大吸收波长254nm，摩尔吸收系数=6200）
常用荧光衍生化试剂
⑴丹磺酰氯（激发波长340nm，发射波长355nm）
⑵ 丹磺酰肼（激发波长340nm，发射波长525nm）
⑶ 荧光胺 （激发波长340nm，发射波长525nm）
⑷ 邻苯二甲醛（激发波长340nm，发射波长455nm）
⑸4-溴甲基-7-甲氧基香豆素（激发波长365nm，发射波长420nm）
⑹ 芴代甲氧基酰氯（激发波长260nm，发射波长310nm）
⑺荧光素异硫氰酸酯（激发波长350nm，发射波长383nm）
⑻4-氯-7-硝基苯一氧二氮杂茂（激发波长380nm，发射波长530nm）
格利雅试剂详细资料大全
最佳答案格利雅试剂简称格氏试剂。本试剂是1901年法国V.Grignard所 发现，其简单表示式为RMgX，其中R表示有机 基团，X表示卤素。格利雅发现在无水乙醚中碘代甲烷很容易与金属镁起反应，生成可溶性有机金属卤化物，即格利雅试剂。以后又合成了各种格利雅试剂，广泛用于有机合成，现在仍是有机化学工业中的重要试剂。
基本介绍
中文名 ：格利雅试剂 英文名 ：Grignard reagent 别称 ：格林试剂、格氏试剂、格林尼亚试剂 化学式 ：RMgX 发现人 ：V.Grignard 发现时间 ：1901 套用 ：有机合成 试剂特点,格利雅试剂的套用,制备方法,
试剂特点
格利雅试剂一般不单独使用，而是将其溶于有机溶剂中使用。因为 它对空气敏感，处理时，反应器必须用干燥氮气 置换。以RMgX表示，只是一种简单的示意方 法，实际上格利雅试剂是由多种化合物形成的 一种平衡体系。这种平衡称为许克伦平衡：2RMgX⇌R
2
Mg+MgX
2
若溶剂的种类、格利雅试剂的浓度等发生变化时，化合物的组成情况也将改变，例如在碱性较弱的乙醚溶液中，如果格利雅试剂浓度高，由于 试剂本身的缔合而产生的二聚物(R
2
Mg
2
X
2
)较多；而在配位性强的四氢呋喃溶剂中，单聚物较多，格利雅试剂中含有极性很强的C—Mg键， 所以很活泼，能被许多含活泼氢的物质，如水、 醇、酸和氨等分解而放出烃，这是因为Mg的存在，R带有负电性，可以和正离子结合，也可以和因极化而带正电的分子的某一部分结合，所以含有活泼氢的物质中的氢就与R结合。格利雅试剂还可以和C=O、C≡N、C=S、S=O、 N=O等不饱和键发生加成作用，也可以和卤化物作用。例如：RMgX+H—Y→YMgX+RH 式中：Y=卤化物、OH、OR、SR、COOR、NH
2
、NHR、NR
2
、NHCOR、C≡CR等 。
格利雅试剂的套用
格利雅试剂的套用十分广泛，重要的有： ①可以和许多含有活泼氢的化合物发生 剧烈反应而生成烃。 2RMgX+NH
4
Cl→ 2RH+Mg(NH
2
)X+MgXCl 酸、醇、酚、肟等均可发生上述反应，而制备烃。 ②与有机卤代物反应，生成碳原子较的烷烃(增长碳链)、环烷烃或不饱和烃。 RMgX+R′X→R—R′+MgX
2
③与甲醛、环氧化物或卤代醇反应可制得伯醇；与醛或甲酸酯反应可制得仲醇;与酮、酯、 酰氯及酸酐反应，可制得叔醇。 ④制备羧酸及其酯。将二氧化碳导入格利 雅试剂中，可制得羧酸;用氯代酸酯与格利雅试 剂反应，可制得酯。 RMgX+CO
2
→RCCOH ClCOOR′+RMgX→RCOOR′ ⑤与原甲酸酯、甲酰胺、羧酸或腈等反应 可以制备醛或酮。 ⑥含氮化合物与格利雅试剂反应，可制备胺。 CH
3
(CH
2
)
4
MgBr+CH
3
ONH
2
→ CH
3
(CH
2
)
4
NH
2
⑦和腈反应，可制备叔胺。 ⑧与氯化腈或二腈反应，可制得腈。与己 二腈反应，然后水解，可制备二酮。 格利雅试剂还可用于有机矽化物、有机锡化物、有机磷化 物、有机硼化物等方面。以不对称膦络合物为催 化剂，利用格利雅试剂的偶合反应，可制得光活 性物质。还可用于高分子聚合时的催化剂。
制备方法
通常使金属镁与有机卤代物在无水 乙醚中反应而制得格利雅试剂。 RX+Mg=RMgX 使用的原料和溶剂必须充分干燥。有机卤代物可以是脂肪族或芳香族等，根据卤素的种类、反应是否容易，格利雅试剂收率高低而有所不同。 反应的难易主要取决于卤代烃中烃的结构和卤素的种类，若烃基相同，碘最容易反应，氯最难反应，但用碘时，易发生Wutz副反应而降低收 率。若卤素相同，烃基愈大，反应愈难。有时为了 提高收率，尽可能要低卤浓度下及低温度下反应。 为了提高反应，在开始时加入少量碘来引发反应，一旦反应开始，因为反应是放热的， 应迅速冷却。也可用少量1，2-二溴乙烷代替 碘，特别是乙醚中有少量水时，采用此法更佳， 因为生成的溴化镁有脱水作用。关于溶剂，可以 采用乙醚、丁基醚、四氢呋喃和苯甲醚等。溶剂不同，直接影响反应的难易和收率的高低，根据 H.Normant的研究，以四氢呋喃较合适，可使历来感到困难的以氯乙烯、氯苯制取格利雅试剂变得很容易。这是因为氯乙烯与结合在烯碳 上的氯不能在乙醚中与镁反应，但可在四氢呋 喃中反应，这样制得的氯乙基镁试剂，又称为诺曼试剂。除四氢呋喃外，也可用2-甲基四氢呋喃为溶剂。 为了更好地启动镁与卤代烃的反应,可用少量1,2－二溴乙烷代替碘，特别是乙醚中如有少量水时，二溴乙烷与镁很快反应，生成溴化镁和乙烯，溴化镁有去水干燥作用，新鲜的镁与给定的卤代烃就可反应生成需要的格利雅试剂，而不发生碘代烃的副反应。这种启动反应叫做制备格利雅试剂的夹带方法。 乙炔或其他端基炔烃与乙基格利雅试剂发生金属化反应，得到乙烷和炔基镁油状不溶性物，后者可溶于四氢呋喃中，作格利雅试剂用。
tris是什么试剂？
最佳答案tris是氨基甲烷缓冲液。
氨基甲烷缓冲液是中化学制剂，氨基甲烷缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。三羟甲基氨基甲烷被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。三羟甲基氨基甲烷缓冲液的低离子强度特点可用于线虫核纤层蛋白的中间纤维的形成。
缓冲特性：
Tris为弱碱，在室温（25℃）下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。
Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。不同温度下Tris的pKa(0.1M)。
高中生物实验中常用的染料有哪些
最佳答案1、龙胆紫，又名甲紫、结晶紫
甲紫属于三苯甲烷类染料消毒剂，和微生物酶系统发生氢离子的竞争性对抗，使酶成为无活性的氧化状态，从而发挥杀菌作用。主要对革兰氏阳性菌如葡萄球菌、白喉杆菌，以及绿脓杆菌、白念珠菌、表皮癣菌有杀灭作用，对其他革兰氏阴性菌和抗酸菌几乎无作用。
2、醋酸洋红
在涂抹法与压碎法中，醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在煮沸的45%醋酸中加洋红使之饱和，再加入微量的铁离子，便使醋酸洋红材料在为醋酸固定的同时，洋红将核或染色体染成红色。PH呈酸性。
3、斐林试剂
二价铜离子的酒石酸钾钠配合物，可以被脂肪醛或还原性糖还原为氧化亚铜。斐林试剂为深蓝色溶液， 在与脂肪醛或还原性糖共热时， 蓝色消失，析出红色的氧化亚铜沉淀。在氧化亚铜析出过程中， 反应液的颜色可能经过由蓝色→绿色→黄色→红色沉淀的逐渐变化，反应较快时，直接观察到红色沉淀。
它与可溶性的还原性糖（葡萄糖、果糖和麦芽糖）在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此，斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。
4、班氏试剂
本尼迪特试剂，也称班氏试剂、本尼迪克试剂、本尼迪克试液或班乃德试剂，是一种浅蓝色化学试剂。本尼迪特试剂是斐林试剂的改良试剂，它与醛或醛糖反应生成红黄色沉淀。它是由硫酸铜、柠檬酸钠和无水碳酸钠配置成的蓝色溶液，可以存放备用，避免斐林溶液必须现配现用的缺点。
5、酚酞
酚酞是一种常用酸碱指示剂，广泛应用于酸碱滴定过程中。通常情况下酚酞遇酸溶液不变色，遇中性溶液也不变色，遇碱溶液变红色。
6、溴麝香草酚蓝
溴麝香草酚蓝（Bromothymol Blue），又名溴百里香酚蓝。英文简称BTB。溴麝香草酚蓝是一种酸碱指示剂、吸附指示剂。 在生物学实验中常用作水生生物的呼吸试剂。
参考资料来源：百度百科-甲紫
参考资料来源：百度百科-醋酸洋红
参考资料来源：百度百科-斐林试剂
参考资料来源：百度百科-本尼迪克特试剂
参考资料来源：百度百科-酚酞试液
参考资料来源：百度百科-溴麝香草酚蓝
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